sábado, 28 de marzo de 2015

Células

CÉLULAS

Las células eucariotas poseen un núcleo definido con el material genético organizado en cromosomas. Todos los organismos multicelulares están formados por células eucariotas y también muchos organismos unicelulares y coloniales.

Materiales
·         1 microscopio óptico
·         5 portaobjetos
·         5 cubreobjetos
·         1 agitador
·         1 bisturí con navaja
·         1 vaso de precipitado de 100 ml
·         2 goteros
·         1 servilleta de papel
·         1 trozo de papel seda
·         1 cada de Petri

Sustancias
·         Agua destilada
·         Reactivos de Gram: cristal violeta, lugol, alcohol-cetona, safranina.
·         Sudan III
·         Yogur casero
·         Agua de charco o de florero
·         Cebolla, papa, plátano, manzana, papaya, aguacate, nuez, zanahoria, betabel.
·         Flores de gladiola roja.
·         Elodea (planta acuática, que llaman cola de zorro).

Procedimiento
Células bacterianas
Las bacterias son células muy pequeñas (1 a 2 micrómetros) y pueden tener forma esférica (cocos), de bastón (bacilos) o espiral (espirilos).

1.       Haz un frotis de una muestra de yogur.
2.       Realiza una tinción con Gram.
3.       Colócale un portaobjetos y obsérvalo a inmersión.
4.       Identifica la forma de la célula, la pared y el citoplasma
5.       Dibuja los esquemas en los cuadros para resultados.

Bacterias verde-azules (cianobacterias)
Las cianobacterias son organismos procariontes fotosintéticos. La clorofila que contiene está dispersa en el citoplasma. Además la clorofila, las cianofitas poseen pigmentos accesorios (carotenoides y ficobilinas).

1.       Coloca sobre un portaobjetos una gota de agua de un charco estancado y verde-azul.
2.       Coloca un cubreobjetos y observa al microscopio con el objetivo seco fuerte.
3.       Dibuja lo observado y señala las estructuras celulares identificadas.

Pared celular y núcleos en células de catafila de cebolla.
La cebolla es un tallo del cual nacen hojas modificadas llamadas catafilas, que no poseen clorofila y almacenan gran cantidad de carbohidratos.

1.       Despende con una pinza la epidermis interna de un trozo de catafila de cebolla.
2.       Coloca una pequeña porción de la película sobre un portaobjetos, añádele una gota de agua y una de lugol, y acopla un cubreobjetos.
3.       Observa con los objetivos seco débil y seco fuerte.
4.       Dibuja lo observado y señala las estructuras celulares identificadas.

Cloroplastos y pared celular en células de hojas de Elodea.
Las hojas de Elodea se pueden observar al MO sin ninguna preparación previa ya que están formadas por dos capas de células.

1.       Coloca una hojita de Elodea sobre un portaobjetos.
2.       Agrégale una gota de agua y colócale el cubreobjetos.
3.       Observar a seco débil y fuerte.
4.       Dibuja las células y señala las estructuras identificadas.

Amiloplastos en tubérculos de papa
Los Amiloplastos son plastidios que contienen el almidón presente en el tubérculo de la papa.

1.       Corta un trozo de tubérculo de papa y raspa la superficie de corte con una hoja de afeitar o de bisturí.
2.       Coloca el raspado en una gota de agua sobre un cubreobjetos.
3.       Agrega una gota de lugol.
4.       Acopla un portaobjetos y observa con los objetivos seco débil y seco fuerte.
5.       Localiza los amiloplastos teñidos de azul.
6.       Dibuja las células y señala las estructuras identificadas.



Amiloplastos en plátano
 Las células del plátano poseen amiloplastos que almacenan almidón pero que se diferencian de los amiloplastos de la papa en su morfología.

1.       Raspa una pequeña cantidad de tejido de la superficie del fruto.
2.       Dispérsala sobre el portaobjetos.
3.       Agrega una gota de lugol.
4.       Coloca un cubreobjetos y observa con los objetivos seco débil y seco fuerte.
5.       Dibuja las células y señala los amiloplastos identificados.
6.       Compara la morfología de los amiloplastos de papa y de plátano.
7.       Repite el procedimiento anterior con manzana y papaya. Compara la estructura de los amiloplastos.


 Cromoplastos de zanahoria y betabel
En la zanahoria y el betabel, así como en otras partes de distintas especies de plantas, se encuentran cromoplastos que contienen pigmentos amarillos, naranjas o rojos, llamados carotenos.

1.       Corta una delgada capa de tejido de la porción más externa de la zanahoria.
2.       Colócala sobre una gota de agua en el portaobjetos.
3.       Acopla un cubreobjetos.
4.       Observar con los objetivos seco débil y seco fuerte. Los cromoplastos están teñidos naturalmente.
5.       Dibuja las células y señala los cromoplastos identificados.
6.       Procede del mismo modo con el betabel.

Cromoplastos en flores coloridas
Las flores de color entre azul y rojo contienen en los cromoplastos unos pigmentos llamados antocianinas.

1.       Desprende la epidermis lo más delgada posible de una flor colorida, puede ser gladiola.
2.       Colócala sobre un portaobjetos con una gota de agua destilada y cúbrela con el cubreobjetos.
3.       Observa con los objetivos seco débil y seco fuerte.
4.       Dibuja las células y señala los cromoplastos identificados
  

Oleoplastos en células de aguacate o nuez
Son plastidios que almacenan aceites como reserva de compuestos energéticos.

1.       Haz un rasado del aguacate (o macerado de la nuez) y coloca una pequeña porción sobre un cubreobjetos con una gota de agua.
2.       Agrega una gota del colorante Sudán III.
3.       Observa con los objetivos seco débil y seco fuerte. Los oleoplastos se ven de color naranja.
4.       Dibuja las células y señala los oleoplastos identificados.

Células animales

1.       Con un portaobjetos y muy cuidadosamente haz un raspado de la cara interna del labio inferior.
2.       Extiende la masilla que quedó en el borde del portaobjetos y mezcla con una gota de agua destilada.
3.       Agrega una gota de safranina y coloca el cubreobjetos.
4.       Observa con los objetivos seco débil y seco fuerte.
5.       Dibuja las células y señala las partes identificadas.


Comentario:
Fue una práctica un tanto laboriosa pero se pudo apreciar de una buena manera las partes de la célula, para así mismo reafirmar nuestros conocimientos obtenidos en clase.


Fotos:








sábado, 7 de marzo de 2015

Prueba para la detección de la hormona HCG en Tira

Prueba para la detección de la hormona HCG en Tira

RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA

La hormona gonadotropina crónica (hCG) es una hormona glicoprotéica sintetizada por la placenta y detectable en la sangre y en la orina de manera temprana después de la implantación de un ovulo fertilizado en el tejido crónico .Es la señal principal y el marcador especifico que existe embarazo. El uso de anticuerpos monoclonales en la sub-unidad Beta de hCG es un importante avance que proporciona la posibilidad de fabricar una nueva generación de inmunoensayos con especificidad consistente y alta sensitividad para detectar hCG.

Materiales requeridos pero no provistos
1.      Contenedor para la toma de muestra
2.      Controles positivos y negativos comercialmente disponibles
3.      Centrifuga con capacidad de 1000g (para los casos que desee centrifugar muestras de sangre total y llevar a cabo la prueba con suero)

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA

Método 1:
1.-Sumerjea la tira en la muestra de orina o suero.Asegurese que el nivel de la muestra esté por debajo de la línea denominada “MAX”.
2.-Coloque la tira en una superficie plana tan pronto la muestra absorbida empiece a correr en la membrana (usualmente tard de 4 a 8 segundos).
3.-Espere para llevar acabo la interpretación de los resultados.

Método 2:
Coloque la tira en una superficie plana y limpia, con la flecha apuntando hacia la persona que lleva acabo la prueba.
1.- Coloque 3 o 4 gotas de muestra de orina o suero en el cojin de absorción por debajo de la línea denominada “MAX”
2.-Espere para llevar acabo la intrpretacion de los resultados.

Método 3:
1.- Coloque en un rack un tubo de ensayo con suficiente muestra de orina o suero teniendo en consideración que el nivel de muestra se mantenga por debajo de la línea de la prueba denominada “MAX
2.- Introduzca la tira en un tubo de ensaye
3.- Espere la interpretación de resultados

Interpretación de resultados
1.      Resultado POSITIVO
Adicionalmente a la línea rosada-rojiza de la zona de control aparecerá otra línea en la zona de test. El tiempo óptimo para observación es de 2.5 a 3 minutos. Sin embargo, un resultado positivo puede surgir a partir de 1 segundos de transcurrida la prueba

2.      Resultado NEGATIVO
Solamente una línea rosada-rojiza aparecerá en la zona de control y NADA en la zona de test.

3.      Resultado INVALIDO
Después de 90 segundos no aparecen líneas en la zona de test ni en la zona de control ó únicamente una línea en la zona de test. Esta prueba deberá excluirse. Lo anterior puede deberse a que se llevaron a cabo pasos de manera inapropiada en el procedimiento de la prueba ó simplemente al deterioro de los reactivos. En dicho caso la muestra deberá ser evaluada con otra nueva Tira.

Conclusión:
El resultado fue positivo, pero como la paciente tenia máximo 6 semanas de embarazo, la hormona presente no se pudo apreciar de la mejor manera posible. La técnica es muy sencilla pero de gran utilidad y se espera que se vuelva a prácticar.




BIOMOLECULAS


Biomoleculas
En esta actividad aplicaras la metodología para comprender y resolver problemas de su entorno, utilizando las ciencias experimentales, además de que seguirás normas de seguridad cuando uses y manejes sustancias, instrumentos y equipos en el laboratorio de química y biología.

Introducción
Entre los compuestos fundamentales de la materia viva de las células encontramos los carbohidratos, lípidos y proteínas; por esta razón, los alimentos que consumen todos los heterótrofos, incluido el ser humano, deben contener necesariamente esta macromoléculas.
Mediante el uso de pruebas químicas sencillas se pueden identificar en los alimentos la presencia de estas macromoléculas.

Materiales:                                                                               Sustancias
·       10 tubos de ensayo                                      Reactivo de fehling
·       1 gradilla                                                       Ácido clorhídrico al 50%
·       2 vasos de precipitados de 100ml               Lugol (solución alcohólica de yodo
·       1 agitador                                                     
·       2 pinzas para tubo                                       Para proteínas:
·       1 mechero Bunsen                                        Reactivo de Biuret
·       1 gotero                                                         Ácido nítrico concentrado
·       1 pliego de papel estraza                             Hidróxido de amonio concentrado
Muestras de alimento
·       Harinas (trigo)
·       Frutas (manzana)
·       Verduras (zanahorias)
·       Carnes (hígado de pollo)
·       Lácteos (queso)
·       Semillas (haba)
De preferencia que los alimentos estén hervidos, a excepción de las frutas.
Trabajaras con cantidades suficientes para que alcances a observar las reacciones, pero que no pongan en riesgo su integridad física.

Procedimiento:
1.- Prueba de Lugol (se utiliza para identificar almidones)
* Coloca una pequeña cantidad de la muestra en un tubo de ensayo
* Agrega dos gotas de Lugol
* Observa el color que toma la muestra al reaccionar con el Lugol
* Repite la prueba por lo menos con 5 alimentos diferentes
* anota los resultados en la tabla
Si la muestra contiene almidón, con el Lugol adquirirá una coloración azul oscuro (prueba positiva); si no, tomará el color ámbar del reactivo (prueba negativa).
Los residuos contienen almidones y yoduros, que de acuerdo con las normas ecológicas ECOL se pueden verter directamente en el desagüe.
2.- Prueba de Fehling (se utiliza para identificar azucares reductores)
* Agrega 0.5 de solución de Fehling A y 0.5 ml de Fehling B a una pequeña porción de muestra colocada en el tubo de ensaye.
* Agrega 2 ml de agua si la muestra es sólida.
* Caliente a ebullición por 2 minutos, cuidado que la muestra no se proyecte. El calentamiento puede realizarse en baño maría, y la boca de los tubos debe estar dirigida donde no haya personas.
* Observa el color de la reacción y anota los resultados en el cuarto.
* Repite la prueba por lo menos con 5 alimentos diferentes. Puedes preparar todos los tubos y meterlos juntos al baño maría.
Si la muestra contiene azucares reductores, al reaccionar con el reactivo de Fehling se formara un precipitado de café rojizo (prueba positiva); si no, la muestra queda de color azul del reactivo (prueba negativa).
Los residuos contienen cobre, por lo que la parte liquida debe colocarse en un contenedor de plástico para su tratamiento o almacenamiento temporal, hasta que pueda desecharse.

Reacciones para identificar proteínas
1.- Prueba de Biuret (se utilizan para identificar proteínas y polipeptidos, no menores de tres muestras aminoácidos, en solución o al estado sólido)
* Agrega 1 ml de reactivo de Biuret a una pequeña porción de muestra colocada en cada tubo de ensayo.
* Observa la coloración que toma la muestra.
* Anota los resultados en el cuadro.
* Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes.
Si en la muestra hay proteínas se observará que la muestra toma una coloración violeta o morada (prueba positiva); si se queda de color azul, quiere decir que en la muestra no hay proteínas (prueba negativa).
Los residuos contienen cobre, por lo que la parte liquida debe colocarse en un contenedor de plástico para su tratamiento o almacenamiento temporal, hasta que pueda desecharse.
2.- Reacción xantoproteica (se utiliza para identificar proteínas que contienen aminoácidos aromáticos).
a) Agregar 1 ml de ácido nítrico concentrado a una pequeña porción de muestra colocada en un tubo de ensaye, calienta con precaución, sujetando el tubo con unas pinzas para tubo de ensaye, y metiendo y sacando el tubo de la flama para evitar que se proyecte la solución, y dirigiendo la boca del tubo hacia donde haya personas. Puedes calentarlos en baño maría. Espera que se enfrié.
b) Deja resbalar por las paredes del tubo 1 ml de hidróxido de amonio (no respires los vapores) sin agitar, de tal forma que se formen dos capas.
c) Anota los resultados en el cuadro.
d) Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes
Si en la muestra hay proteínas, se formará un anillo de color naranja entre las capas formadas por el ácido y el hidróxido (prueba positiva).
Los residuos contienen un ácido y una base, por lo que mezclan con mucho cuidado las dos capas para que ambas soluciones se neutralicen y puedan desecharse.

Resultados
Alimentos
Carbohidratos
Proteínas
Lugol
Fehling
Biuret
Xantoproteica
1
Queso panela
-
N/A
-
+
2
Haba
-
N/A
-
+
3
Trigo
-
N/A
-
+
4
Zanahoria
-
N/A
-
+
5
Hígado
-
N/A
-
+




Evidencias