Recuento de plaquetas

RECUENTO DE PLAQUETAS

OBJETIVO

Realizar  e interpretar la técnica para la cuenta de trombocitos o plaquetas en la cámara de Neubauer.

FUNDAMENTO

Los trombocitos o plaquetas constituyen una parte esencial del organismo hemostático del cuerpo. Son cuerpecillos hialinos incoloros que miden de 2-4 μ, de bordes irregulares, pero pueden tener forma esférica u ovalada, carecen de núcleo y son muy frágiles. Provienen de una célula gigante que mide de entre 50-100 μ de diámetro llamada megacariocito.

Una de las principales funciones de las plaquetas es participar en los mecanismos de la hemostasia (Hemos=sangre, stasis=detención) adhiriéndose entre ellas y a las paredes de los vasos sanguíneos lesionados, para formar así el trombo plaquetario o tapón hemostático.

El líquido diluyente puede ser una solución estéril de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo (85 milimolar) y cloruro de sodio (31 milimolar). Este líquido se provee listo para usar y su conservación es indefinida en refrigerador (2 - 10° C) o puede ser también oxalato de amonio al 1%. El fundamento del método consiste en la producción de hemólisis por la utilización de un líquido hipotónico, y el mantenimiento de las plaquetas intactas y sin agrumar por la presencia de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo.
 

MATERIAL

v  Pipeta de Thoma para glóbulos rojos (perla roja)

v  Equipo para venopuncion (Tubo lila)

v  Boquilla roja

v  Tubo de goma

v  Tubos de ensayo

v  Papel parafilm

v  Cámara de Neubauer

v  Cubrehematimetro

v  Microscopio

v  Gasas

v  Caja de Petri

v  Papel filtro

SUSTANCIAS

Ø  Alcohol al 70%

Ø  Sangre venosa

Ø   Diluyente de plaquetas

PROCEDIMIENTO

1.    Obtener 10 ml de sangre venosa, en un tubo con anticoagulante EDTA

2.    Agitar la sangre de manera suave en el tubo para mezclarla con el anticoagulante

3.    Llevar la sangre hasta la marca 1.0 de la pipeta de Thoma. Limpiar la punta con una gasa

4.    Aforar con liquido diluyente de plaquetas hasta la marca 101 de la pipeta (Dilución 1:100)

5.    Tapar los extremos con papel parafilm y mezclar durante 1 minuto

6.    Colocar la Cámara de Neubauer sobre una superficie horizontal y poner el cubrehematímetro sobre las mesetas

7.    Descartar las primeras 4 gotas de la pipeta. Con la quinta gota cargar la cámara, depositándola entre la meseta y el cubrehematímetro y dejarla difundir por capilaridad, teniendo cuidado de que no se formen burbujas o se derrame el líquido hacia los surcos

8.    Colocar la cámara de Neubauer  ya cargada en el interior de una caja de Petri, con papel filtro humedecido en agua para evitar la evaporación, dejar en reposo de 10 a 15 minutos

9.    Observar al microscopio contando en la cuadricula central (para glóbulos  rojos) las plaquetas  que aparecen mucho más pequeñas que los hematíes, redondas, alargadas u ovales, altamente refringentes

10. El cuadro central de la cuadricula mide 1.0 mm por lado y está dividido en 16 cuadritos más pequeños, de tal manera que el número total de estos últimos es de 400, mismos en los que se lleva a cabo el recuento de plaquetas.

 RESULTADOS

No se pudo hacer un buen conteo ya que el microscopio no sirve bien y no se logro enfocar la cuadricula.

CONCLUSIONES

Esta vez la práctica no resulto lo mejor sin embargo se espera poder volver a hacerla para poder obtener resultados.

Grupo Sanguíneo (Metodo en tubos de ensaye)

                                                               GRUPO SANGUÍNEO

                                                            Método en tubos de ensaye

Principio.-

En la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamados grupos o factores sanguíneos.

Se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H (humana). Sobre esta sustancia se adhieren carbohidratos en un orden determinado. Para la sangre de tipo “O” se unen dos moléculas de galactosa, una de mucosa, una de glucosa y una de glucosaina.

Sobre esta cadena pude adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es glucosamina se tiene el grupo “A” y si es de galactosa se tiene el grupo “B”. Si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo “AB”:

Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos más.

El sistema Rh es independiente del sistema ABO, pero igual de importante en la tipificación sanguínea.

Hay antígenos presentes en los eritrocitos de casi todas las personas y se les llama Universales, otros antígenos se han concentrado en una sola familia y se han concentrado algunos otros que pertenecen solamente a un individuo y se les llama personales.

La importancia de la determinación del factor Rh es en las transfusiones sanguíneas y en la eritroblastosis fetal.

OBJETIVO.- 

El alumno determinará el grupo sanguíneo y el factor Rh de una muestra sanguínea, utilizando los antisueros correspondientes y previa demostración correctamente.

INTRODUCCIÓN.- 

Los grupos sanguíneos se han clasificado así por poseer características diferentes, estas características son los antígenos (Aglutinógenos) y los anticuerpos (Aglutininas) que son los responsables de las reacciones adversas inmunológicas en las transfusiones.

MATERIAL	REACTIVOS
·       Equipo de venopunción ·       Palca de vidrio excavada ·       Aplicadores de madera ·       Lanceta esteril ·       Tubos de ensaye ·       Gradilla ·       Centrifuga	·       Suero anti A ·       Suero anti B ·       Suero anti D ·       Sol. Isotónica de NaCl al 0.9%

METODO DE TUBO DE ENSAYE.-

TECNICA.- 

1.-Previa asepsia practicar venopunción y recoger 1 ml de sangre.

2.-Depositar en un tubo de ensaye una gota de sangre y 4.9 ml de so. Isotónica de NaCl al 0.9% para formar una suspensión de eritrocitos al 2%.

3.-Marcar tres tubos de ensaye con las letras A, B, Rh respectivamente, depositar en el tubo A una gota de suero Anti A, en el tubo B una gota de suero Anti B y en el tubo Rh una gota de suero Anti D.

4.-Añadir a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos al 2% (preparados con anterioridad).

5.-Centrifugar a 1000 r.p.m. durante un minuto.

6.-Sacar los tubos e inmediatamente observar si existe aglutinación.

Interpretación de resultados.

Grupo Sanguíneo                                                Antisueros

	Anti A	Anti B	Anti AB	Anti D
A	Aglutinación	No aglutinación	Aglutinación	No aglutinación
B	No aglutinación	Aglutinación	Aglutinación	No aglutinación
AB	Aglutinación	Aglutinación	Aglutinación	No aglutinación
O	No aglutinación	No aglutinación	No aglutinación	No Aglutinación
D	No aglutinación	No aglutinación	No aglutinación	Aglutinación

-Si existe aglutinación en el tubo Rh la sangre será de factor Rh positivo.

- Si no existe aglutinación en el tubo Rh la sangre será factor Rh negativo.

Resultados.-
Vanessa.- se determina que el grupo sanguíneo es “B” Factor Rh positivo (+) ya que aglutina en los sueros Anti B y Anti D

Diego.- se determina que el grupo sanguíneo es “A” Factor Rh positivo (+) ya que aglutina en los sueros Anti A y Anti D.

Conclusión.-

Es una practica muy  fácil y útil para poder identificar el grupo sanguíneo que tiene una muestra.

Recuento diferencial de Leucocitos

                                                     INTRODUCCIÓN

El recuento diferencial de leucocitos consiste en reconocer y valorar las proporciones relativas de las distintas variedades de glóbulos blancos que se observan en un frotis teñidos de sangre.
Al conocer la proporción de las células sanguíneas que están presentes en el torrente sanguíneo cualquier trastorno patológico que altere el sistema hematopoyetico podría verse reflejado en un cambio de la proporción de una especie celular. Para el recuento diferencial se tiene que observar un mínimo de 100 leucocitos.
Hay varios métodos pero el más utilizado es el de almena y en línea.

                                            MATERIAL Y REACTIVOS
*Frotis sanguíneo teñido.
*Microscopio.
*Aceite de inmersión.
*Un contador de células.


                                                    PROCEDIMIENTO

1.- Se coloca el frotis en el microscopio y se enfoca.
2.- Se le agrega una gota de aceite de inmersión y se observa con el objetivo de 100X
3.- Si el recuento se hace en línea se empieza en un borde del frotis hasta el otro borde en línea paralela hasta contar 100 leucocitos.
4.-Se van contando los mononucleares (monósitos y linfocitos) y los polimorfos nucleares (neutrófilos, eosinófilos y basofilos) según su morfología.
5.- Se reporta en % (valor relativo) o en valor absoluto (mm3).

                                                 
                                               CONCLUSIÓN

No se pudo hacer bien el conteo porque no se hicieron bien los frotis, aun no sabemos realizarlos y se espera poder volver a hacer esta práctica para obtener un resultado mejorable.

Determinación de Grupo Sanguíneo

Introducción

En la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamados grupos o factores sanguíneos.

Se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H (humana). Sobre esta sustancia se adhieren carbohidratos en un orden determinado. Para la sangre de tipo “O” se unen dos moléculas de galactosa, una de mucosa, una de glucosa y una de glucosaina.

Sobre esta cadena pude adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es glucosamina se tiene el grupo “A” y si es de galactosa se tiene el grupo “B”. Si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo “AB”:

Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos más.

El sistema Rh es independiente del sistema ABO, pero igual de importante en la tipificación sanguínea.

Hay antígenos presentes en los eritrocitos de casi todas las personas y se les llama Universales, otros antígenos se han concentrado en una sola familia y se han concentrado algunos otros que pertenecen solamente a un individuo y se les llama personales.

La importancia de la determinación del factor Rh es en las transfusiones sanguíneas y en la eritroblastosis fetal.

  

FACTOR Rh

OBJETIVO.- El alumno determinará el grupo sanguíneo y el factor Rh de una muestra sanguínea, utilizando los antisueros correspondientes y previa demostración correctamente.

INTRODUCCIÓN.- Los grupos sanguíneos se han clasificado así por poseer características diferentes, estas características son los antígenos (Aglutinógenos) y los anticuerpos (Aglutininas) que son los responsables de las reacciones adversas inmunológicas en las transfusiones.

MATERIAL	REACTIVOS
·       Equipo de venopunción ·       Palca de vidrio excavada ·       Aplicadores de madera ·       Lanceta esteril ·       Tubos de ensaye ·       Gradilla ·       Centrifuga	·       Suero anti A ·       Suero anti B ·       Suero anti D ·       Sol. Isotónica de NaCl al 0.9%

MÉTODO PARA PORTAOBJETOS O PLACA.-

Se utiliza la punción cutánea por medio de la placa, se desecha la primera gota y se deposita una gota en cada una de las excavaciones de la placa en forma horizontal o marcar con letras A, B, y Rh, posteriormente se añade una gota de suero Anti A, Anti B y Anti D respectivamente.

Mezclar perfectamente con un hisopo (aplicador) cada preparación (no contaminar las diferentes preparaciones).

Agitar suavemente la placa con movimientos circulares durante 30 segundos aproximadamente.

Leer el resultado (una aglutinación macroscópica indicará la reacción).

Anti A	Anti B	Anti D	El grupo sanguíneo y su Factor será:
+ + - - + + - -	- - + + + + - -	+ - + - + - + -	A Rh positivo A Rh negativo B Rh positivo B Rh negativo AB Rh positivo AB Rh negativo O Rh positivo O Rh negativo

·       En donde (+) existencia de aglutinación

·       En donde (-) ausencia de aglutinación

E

     Resultados:

   Vanessa Oviedo:   O Rh positivo

   Diego Arteaga:     O Rh positivo

   Laura Trejo:            O Rh positivo

    Conclusión:

   Esta practica es muy sencilla y rápida pero de gran utilidad para tener la información de que grupo sanguíneo somos.